
標本處理:
1、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
2、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。
3、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
4、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致載脂蛋白ELISA檢測試劑盒實驗結果偏差。
5、實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
6、若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7、本公司只對載脂蛋白ELISA檢測試劑盒本身負責,不對因使用該載脂蛋白ELISA檢測試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本
實驗條件如下:
1、固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維 素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。
2、包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一 般要求PH在9.0~9.6之間。
3、 酶標記抗體工作濃度的選擇:先用直接載脂蛋白ELISA檢測試劑盒進行初步效價的滴定。然后再固定其 它條件或采取“方陣法",在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
4、酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,載脂蛋白ELISA檢測試劑盒應注意防護。
注意事項:
1、 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果載脂蛋白ELISA檢測試劑盒判定必須以酶標儀讀數為準。
3、為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
6、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸,使用時必須注意安全。
7、各步驟加樣均應使用加樣器,并經常校準其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
8、每次試驗測定載脂蛋白ELISA檢測試劑盒的同時做標準曲線,。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔zui高濃度的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n)。