細胞株開發過程簡單敘述以及購買注意事項
瀏覽次數:903發布日期:2020-10-12
細胞株開發(Cell line development,CLD)的過程與生物藥開發的早期所涉及過程有所不同。創建穩定的用于的高產細胞株的步驟包括:宿主細胞株選擇,表達載體工程,轉染,克隆和細胞擴增,以及各種篩選步驟,從而選擇細胞活力高,生長能力強,并且表達水平、以及表達的穩定性、質量情況都具有高表現的單克隆細胞株。這一過程,不同的企業平臺也可以采用許多不同的策略來優化其工作流程,而其中的篩選過程直接決定了細胞形成單克隆細胞株的水平,因而顯得尤為重要。
一些經驗豐富的專家,也對此有著深刻的見解。來自Pathway Biopharma的CEO Jon Dempsey博士指出,由于CLD和*臨床藥物的開發正處于將新型療法推向臨床試驗的關鍵階段,因此公司正在尋求采取一切可能的措施來加快開發過程。如果今天我要構建CLD系統,那么我將首先談到以下四個階段:
1、工作流程的制定,然后在過程中使用定向進化或克隆選擇來設計適合此工作流程的細胞系。
2、使用合成載體技術,從而促進表達。
3、運用自動化平臺,消除單輪細胞克隆的過程,從而消除手工流程,加速進程。
4、減少細胞倍增時間,使工作盡可能的聚焦于細胞快速生長。
購買細胞株注意事項:
客戶收到細胞后請務必仔細閱讀細胞注意事項,確保細胞的培養條件一致,如果由于培養條件不一致導致細胞出現問題,責任有客戶自行承擔。
1.客戶在收到細胞時,請首先觀察培養瓶是否完好,培養液是否外滲,培養液是否混濁。如發現有瓶破、滲漏、培養液混濁等問題,請在收到細胞后立即與我們聯系。
2.由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請離心收集,重懸細胞,置培養箱培養,細胞會重新貼附于瓶壁。如果細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。
3.收到細胞時如無異常情況,請按照細胞處理方法處理細胞。
4.購買細胞的客戶有培養細胞的經驗,客戶收到細胞,原瓶里的培養液可以收集繼續使用,在di一次消化傳瓶時,我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液,其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液,這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。