
人ELISA試劑盒實驗原理:
將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入人ELISA試劑盒微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
人ELISA試劑盒性能:
1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。人ELISA試劑盒-ⅢELISA檢測試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
人ELISA試劑盒操作注意:
1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務必按照所用人ELISA試劑盒說明書嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應時間的誤差,做大量標本時,一孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響,建議校對加樣器。