詳細分析酵母菌落直接PCR檢測試劑盒的優勢和操作步驟
瀏覽次數：803發布日期：2021-07-24
酵母菌落直接PCR檢測試劑盒主要用于酵母單雜pAbAi質粒重組基因組后的鑒定實驗，同時提供PCR Mix以及通用引物混合物，無需額外準備，可快速高效完成PCR擴增，產物可用于DNA測序。亦適用于其它重組酵母菌的PCR檢測實驗。如需檢測的樣品為游離質粒而非基因組重組質粒，建議使用陽性克隆檢測試劑盒（SK2420）進行PCR擴增。
酵母菌落直接PCR檢測試劑盒的優勢：
1、特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測。
2、重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證。
3、靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4、實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
操作步驟：
1、準備PCR預混液：根據檢測克隆數，等比例擴大配制體積。
2、吸取5μL酵母快速裂解液加入PCR管中。
3、用無菌牙簽或10μL槍頭刮取適量酵母菌落（直徑1-2mm）懸浮在裂解液中。
4、吹打或者震蕩混勻后室溫靜置5 min。即為裂解產物。
注意：大于2000bp的基因片段作為Bait，建議將裂解產物再于-20℃冷凍10min或-80℃速凍1min，可有效提高PCR產率。
5、在裂解產物中加入45μL PCR預混液（含引物），PCR擴增。
注意事項：
1、菌落PCR前，先刮取部分菌落保存，可以有效避免樣品污染和丟失。
2、新鮮菌落的PCR成功率接近100%。如生長期較長的菌落，請先進行預實驗。
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