有關牛血清白蛋白試劑盒的操作步驟,以下有詳細說明
瀏覽次數:805發布日期:2021-09-24
牛血清白蛋白是來自牛的血清白蛋白,是一種小而穩定的中等非反應性蛋白,它通常用作測定蛋白質濃度的標準品和免疫組織化學中的阻斷劑。在免疫組織化學中,組織切片通常與BSA阻斷劑孵育以結合非特異性結合位點。BSA也用作細胞和微生物培養物中的營養物質。在限制性消化中,BSA用于在DNA消化過程中穩定一些酶,并防止酶對反應管,移液管吸頭和其他血管的粘附。
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3、待測樣本孔先加生物素10μL,再加待測樣本50μL;
4、隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm 波長處測定各孔的OD值。
洗板方法:
1、手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2、自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
結果判斷:
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。