
評估小鼠ELISA試劑盒的重復性需通過以下關鍵指標和實驗方法:
一、?板內重復性(批內變異)?
同一批次內對同一樣本重復檢測(建議≥5次),計算變異系數(CV%),優質試劑盒要求CV<5%?。
示例:Invitrogen VCAM-1試劑盒通過14次重復檢測,CV值驗證重現性。
二、?板間重復性(批間變異)?
不同批次試劑盒檢測同一樣本,CV應<10%。
需控制加樣量、溫育時間、洗板次數等參數以減少操作誤差。
三、?多維度驗證?
?陰性/陽性對照?:每板需設置陰性和弱陽性對照,確保信號閾值(如陽性OD>1.5,空白OD<0.3)。
?稀釋線性?:樣本回收率需在80%-120%范圍內。
四、?穩定性測試?
長期保存后(如15天)重復檢測,結果需與初始數據一致。
五、操作建議
?預實驗?:使用已知濃度標準品驗證標曲線性(R2≥0.99)。
?自動化設備?:采用自動洗板機并增加30秒浸泡步驟,提升精度。?
通過上述方法可全面評估試劑盒的重復性,確保實驗數據可靠性。?