這些基礎資料可以讓您更好的了解什么是單克隆抗體!
瀏覽次數:408發布日期:2022-05-29
單克隆抗體是一種免疫學技術,將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞進行細胞融合,獲得既能產生抗體,又能無限增殖的細胞,并以此抗體。是僅由一種類型的細胞出來的抗體,對應于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細胞出來的一種抗體。
哺乳類細胞DNA合成可分為兩條途徑,①從頭(denovo)合成途徑,利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶,可被氨基蝶呤(A)阻斷;②補救(salvag-e)合成途徑,在次Xanthine磷酸核糖轉化酶(HGPRT)存在下利用次Xanthine(H)和胸腺嘧啶(T)。
單克隆抗體技術的流程為:脾細胞和骨髓瘤細胞在聚乙二醇(PEG)作用下發生細胞融合;加人HAT選擇培養基后,未融合的骨髓瘤細胞因其從頭合成途徑被氨基蝶呤阻斷,而又缺乏HGPRT不能利用補救途徑合成DNA,從而死亡;未融合的脾細胞難以在體外培養而死亡;融合細胞因從脾細胞獲得HGPRT,故可在HAT選擇培養基中存活和增殖。
抗體的結構與功能:
1、抗原:進入動物體內對肌體的免疫系統產生刺激作用的外源物質。
包括:蛋白質、多糖、核酸、病毒、細菌、各種細胞等。
特點:外源性、結構性、特異性。
2、抗體:
動物免疫系統分泌的中和或消除抗原物質的影響的糖蛋白,存在于血清中,本質是免疫球蛋白。
動物脾臟有上百萬個B淋巴 細胞,一個細胞就是一個克隆,它針對抗原上的一個抗原決定族產生的抗體是單克隆抗體。
一種抗原通常具有多個不同的抗原決定族,因此能刺激多個B淋巴細胞產生相應的單克隆抗體,因此血清中的抗體是針對不同抗原決定族的單克隆抗體混合物,稱為多克隆抗體。
單克隆抗體的優點:
1、雜交瘤可以在體外存活并傳代,只要不發生細胞株的基因突變,就可以不斷地高特異性、高均一性的抗體。
2、可以用相對不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。
3、由于可能得到“無*”的均一性抗體,所以適用于以標記抗體為特點的免疫學分析方法,如IRMA和ELISA等。
4、由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學功能,可用于體內的放射免疫顯像和免疫導向治療。