油菜內源基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
【注意事項】
1．PCR 操作各階段應嚴格分區操作，避免交叉污染。
2．試劑盒各組分使用前應充分融化混勻，離心數秒后使用。
3．各組分不得與其他產品或不同批號的相應成分進行互換。
4．待測標本若不及時檢測，應保存于-20℃或-70℃。
5．樣品的處理應該嚴格按照生物安全規范操作。
6．PCR 操作人員應具有經驗和受過專業培訓。
7．本試劑盒僅用于科研使用，不做為臨床診斷使用。
商品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
油菜內源基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 48T | AP3454 |
【檢測方法】
1 ． 試劑準備（試劑準備區）
將試劑盒各組分置4℃避光融化，充分混勻后瞬間離心。計算試劑使用份數 N（N=樣本數+1 管陽性對照+1 管陰性對照），根據下表配置反應體系mix，加入一適當體積離心管中，充分混勻后瞬間離心，按 20μL 分裝至 PCR 反應管/板，并轉移至樣本處理區。
組分 | 體積（μL ） |
qPCR 預混液（含酶） | 16 |
引物探針 | 4 |
總體積（反應體系 mix ） | 20 |
2 ． 樣本處理（樣本處理區）
① 核酸提取
選擇合適的盒提取核酸，具體按照相應的試劑盒說明書操作。
② 加樣
在已加入反應體系mix 的 PCR 反應管/板上分別加入處理好的待檢標本核酸、陰性對照、陽性對照各 5μL，終體積為 25μL。
蓋緊管蓋或封膜，瞬間低速離心后置熒光 PCR 檢測儀擴增。
3 ． 擴增檢測（核酸擴增區）
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
①預變性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
②變性 退火/延伸/檢測熒光 | 95℃ 55℃ | 10s 40s | 40cycles |
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