關于植物檢測試劑盒的使用與結果判斷，我有妙招
瀏覽次數：790發布日期：2019-07-08
自備材料：
植物根莖、葉子等；剪刀；螺蓋離心管或鎖蓋離心管或96孔板；1ml玻璃比色皿；分光光度計或酶標儀；水浴鍋或干浴器；離心機
植物檢測試劑盒操作步驟：
1、 樣本處理：
取新鮮植物組織，清洗干凈，擦干，剪碎，迅速稱取， 按照20mg重量加入1ml Pro裂解液的比例加入Pro裂解液（建議使用1.5ml螺口離心管或鎖蓋離心管），沸水浴或干浴處理20分鐘 (期間間歇混勻)，10000rpm離心 2分鐘，上清即為脯氨酸提取液，4℃保存備用。待測提取液如不能及時測定，應置于-20℃保存，1-2天內穩定。
2、 Pro顯色液的配制：
把小管裝的茚三酮粉末，全部加入到茚三酮溶解液中，劇烈混勻至*溶解，即配成Pro顯色液。注意：Pro顯色液具有一定腐蝕性，請小心操作。
3、 配制系列脯氨酸標準溶液：
取1ml 試劑1-Pro裂解液全部加入到裝有Pro標準液的小管中，混勻后*溶解，即配成的Pro標準液（100mg/ml）。
取1 μl 100mg/ml 標準液加入到1ml Pro裂解液中，即配成100μg/ml Pro標準液待用。參照下表配制1-6號不同濃度的Pro標準溶液。
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
ELISA檢測試劑盒實驗結果判斷：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
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