NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
名稱 | NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983 |
種屬 | 大鼠 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 肺；巨噬細胞；肺泡 |
生長特性 | 半貼半懸 |
細胞形態 | 巨噬細胞樣 |
背景描述 | NR8383細胞來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞，NR8383細胞在Gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了8-9個月。隨后，NR8383細胞不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法，從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞，并3次用軟瓊脂亞克隆。NR8383細胞表現出巨噬細胞的特性：吞噬酵母多糖和銅綠、非特異性脂酶活性、Fc受體、氧化降解；分泌IL-1、TNF-β和IL-6，可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應萊霉素，分泌TNF-β前體。NR8383細胞在萊霉素刺激下，TNF-β mRNA表達也上升。NR8383細胞對內毒素敏感，1-10ng/ml的LPS水平抑制增生達50%。即使達到0.001mg/ml的水平，LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。NR8383細胞提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細胞相關活性，此細胞懸浮-貼壁混合生長。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | Ham's F-12K＋20% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1-4×10^5個/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
受體表達情況 | Fc |
基因表達情況 | transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6) |
保藏機構 | ATCC; CRL-2192 |
二、細胞培養操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產品：
GRH ELISA Kit | 貝氏貝諾孢子蟲PCR試劑盒 |
TNF Receptor Associated Factor 6(TRAF6)ELISA Kit | 豬水皰疹病毒RT-PCR試劑盒 |
Annexin A13(ANXA13)ELISA Kit | 同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測試劑盒 |
TGF-β1 ELISA Kit | 人類嗜淋巴細胞病毒通用PCR檢測試劑盒 |
NAP-2/CXCL7 ELISA Kit | 佛手探針法PCR鑒定試劑盒 |
ai-ganglioside aibody,GM1 ELISA Kit | 唾液乳suan桿菌PCR試劑盒 |
TRAIL-R1 ELISA Kit | 小孢子菌屬通用PCR試劑盒 |
Transportin 3(TNPO3)ELISA Kit | 肺炎嗜衣原體PCR檢測試劑盒 |
ai-hepatitis A virus(HAV)aibody ELISA kit | 肺炎嗜衣原體PCR檢測試劑盒 |
Toll Ierleukin 1 Receptor Domain Coaining Adaptor Protein(TIRAP)ELISA Kit | 腺病毒型PCR檢測試劑盒直銷 |
OPG ELISA Kit | AMA 大鼠抗心肌抗體ELISA檢測試劑盒 |
tissue inhibitors of metalloproteinase 1，TIMP-1 ELISA Kit | Apelin17蛋白(AP17)ELISA試劑盒 |
TNFsR-Ⅱ ELISA Kit | NR8383大鼠肺泡巨噬細胞抑制suβE(INHβE)ELISA試劑盒 |
ai-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor aibody,GM-CSF Ab ELISA Kit | apo-A1 小鼠載脂蛋白A1ELISA檢測試劑盒 |
Annexin Ⅵ,ANX-Ⅵ ELISA Kit | Aprataxin蛋白(APTX)ELISA試劑盒 |
© 2019 上海撫生實業有限公司 版權所有 備案號： 技術支持：制藥網 GoogleSitemap 總訪問量：508507 管理登陸
在線咨詢