
唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒價格
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
產(chǎn)品名稱 | 唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Cheilospirura hamulosaPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
Granulin/GRN/Progranulin抗體,鼠單抗51938-32-0HPLC≥98%A079220mg/支ELISA IF ICC/IF 夏佛塔苷
ELISAKitforHumanGlutamate--cysteineligasecatalyticsubunit111047-30-410mg Ginkgolic Acid C17-1 0.156-10 nmol/L銀杏酸 C17-1
NKG2A/NKG2/CD159A/KLRC1抗體,兔多抗,抗原親和純化18059-10-4C27H43NO3Peiminine≥98%ELISA 貝母乙素
人淋巴細胞抗原6復合位點蛋白G6FELISA試劑盒500G 0.156-10 ng/mL2,2'-聯(lián)苯胺二酸(多含30%的水) 2,2'-Benzidinedisulfonic Acid (contains 30% Water at maximum)>70.0%(T)
人Sushi域攜帶蛋白2(SUSD2)ELISA試劑盒5mg 0.312-20 ng/mL地弗地衣酸 DIFFRACTAIC ACID(SH)
ELISAKitforHumanProminin-150mg 0.156-10 ng/mLL-相思豆霉素 ABRINE, L-(RG)
溶液(和化鉀混合溶液)/Iodine(PotassiumIodideMixedSolution)54965-24-1四*亮綠增菌液配套試劑54965-24-1 Tamoxifen Citrate
人跨膜蛋白132D(TMEM132D)ELISA試劑盒10mg 0.156-10 ng/mL咖酸苯乙酯 CAFFEIC ACID PHENETHYL ESTER(CAPE)(RG)
禽流感病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 20mg20(R)Ginsenoside Rg3 HPLC≥98% 0.312-20 ng/mL(R型)人參皂苷Rg3
IL-15/IL15/Interleukin15抗體,兔單抗50mgELISA 乙酰基纈草酸 ACETOXYVALERENIC ACID(P)
ELISAKitforHumanReninreceptor2680-81-1 20mgDehydrodiisoeugenol HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL去氫二異丁香
GBA3抗體(PE),兔單抗480-10-4HPLC≥98%A032520mg/支FCM 紫云英苷
人線粒體二基甘氨酸脫氫酶(DMGDH)ELISA試劑盒486-86-2 20mg Caulophylline 0.625-40 ng/mLN-基野靛堿
TIMD4抗體,兔多抗72063-39-9C28H32O15Spinosin≥98%ELISA 斯皮諾素
兔腎上腺髓質(zhì)細胞 20mg HPLC≥98%Sibiricose A5用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶西伯利亞遠志糖A5
改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)1vial 250g8-Azaguanine(原裝) 8-氮雜鳥嘌呤
唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒價格野鳶尾苷 10mg Irigenin-7-O-beta-D-glucopyranoside ELISAKitforHumanHighmobilitygroupproteinB4
白樺脂; 樺木 HPLC≥96% A0455 GPNMB/Osteoactivin抗體,兔多抗,抗原親和純化 20mg/支
wako 67-63-0 2-Propanol 子起生物 67-63-0 酵母浸出膏/酵母浸膏/酵母提取物/酵母萃取物/酵母抽提物/水溶性酵母浸膏/Yeastextract
L-丙氨酸 ALANINE, L-(P) 100mg ELISAKitforHumanN-terminalpropeptideofCollagenalpha-1(II)chain
維生素K1 20mg Vitamin K1 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒
Abscisic acid (ABA) 脫落酸 100mg 產(chǎn)毒培養(yǎng)基
去氫二異丁香 HPLC≥98% A0443 ADSL/AdenylosuccinateLyase抗體,兔單抗 20mg/支
MethyleneGreen次基綠 1g 改良山梨麥康凱瓊脂添加劑